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枸櫞酸離子含量測定

1 試劑 1.1 標(biāo)準(zhǔn)枸櫞酸鈉濃溶液 精確稱取枸櫞酸鈉(Na3C6H標(biāo)準(zhǔn)5O7·2H2O)0.5882g,加蒸餾水溶解,并準(zhǔn)確稀釋至100ml ,為20mmol/L 枸櫞酸鈉液。 1.2 標(biāo)準(zhǔn)枸櫞酸鈉溶液 精密量取標(biāo)準(zhǔn)枸櫞酸鈉濃溶液5ml,用5%三氯醋酸準(zhǔn)確稀釋至50ml,為2mmol/L枸櫞酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液。 1.310%三氯醋酸:稱取三氯醋酸10g,用蒸餾水稀釋至100ml。 1.45%三氯醋酸:稱取三氯醋酸5g,用蒸餾水稀釋至100ml。 1.5 砒啶(A·R)。 1.6 醋酸酐(A·R)。 2 操作 2.1 樣品 精確量取0.5ml樣品,加 4.5ml 蒸餾水,加5ml10%三氯醋酸,混勻,置60℃水浴 5分鐘,離心去沉淀。精確量取1ml上清液于25ml玻塞試管中,加1.3ml吡啶,混勻,加5.7ml 醋酸酐,立即混勻并置于31℃水浴,準(zhǔn)確培育35分鐘后,于 425nm波長下測 OD值,同時(shí)做空白試驗(yàn):取1ml 5%三氯醋酸代替1ml去蛋白后樣品上清液,其余操作同樣品。 2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 精確量取標(biāo)準(zhǔn)枸櫞酸鈉溶液0.0、0.25、0.50、0.75、1.0ml,分別加5%三氯醋酸1.0、0.75、0.5、0.25、0.0ml?。ㄆ湎鄳?yīng)的枸櫞酸鈉離子含量為0、0.5、1.0、1.5、2.0mmol/l?。?,其余操作從加1.3ml吡啶開始同樣品。可得一標(biāo)準(zhǔn)曲線。 3 計(jì)算 由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得樣品稀釋液相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)枸櫞酸離子Ammol/L。 樣品枸櫞酸離子含量(mmol/L)=A×20